一、实验准备
hPSC诱导分化胰岛类器官试剂盒（abs90131-1kit）
二、诱导流程图
三、试剂盒使用流程：
①EB 形成（2 天）
1、hPSC 于基质胶包被的标准透明6孔板的一个孔，加入2mLAdvance 人多能干细胞培养基，使细胞生长至 70-80%汇合度。
2、将孔中的培养基吸除。
3、在消化期间配置EB形成完全培养基：取 11mL EB 形成培养基与 22μL EB 形成补充剂混匀获得 EB 形成完全培养基，于一个新的超低吸附 6孔板的 3 个孔每孔加入 2mL EB 形成完全培养基，准备后续使用。
展开剩余67%4、向孔中加入 1mL PBS（无钙镁离子）洗，吸去。
5、向孔中加入 1mL accutase，37℃消化 3min。
6、当看到克隆发白发亮，轻轻拍打板侧（每侧拍两下），把细胞拍下来，再在生物安全柜中，加入 1mL EB 形成完全培养基终止消化，把这 2mL 体系吸入装有 3mL EB 形成完全培养基的15mL 离心管离心 160g 5min，吸弃上清至剩余几十微升，轻弹管底 3-4 下，让细胞沉淀溶于上清。
7、往管里加 1mL EB 形成完全培养基，轻弹 3-4 下，混匀即可，把这1mL细胞悬液平均悬空加入提前准备的超低吸附 6孔板3 个孔中，37℃、5%CO2过夜。
8、第二天（D-1）镜下观察可以看到形成大量、均一的 EB，半数换液，补充 50
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